Ensaio Cometa de Fragmentação de DNA Espermático
Mapeamento de Precisão de Quebras de Cadeias de DNA: O Poder do Ensaio Cometa Espermático na Infertilidade Masculina
O que é (Eletroforese de Célula Única)
O Ensaio Cometa de Fragmentação de DNA Espermático utiliza eletroforese em gel de célula única para quantificar danos no DNA em espermatozoides individuais. Ao contrário do ensaio SCD, que mede a dispersão da cromatina, o Ensaio Cometa migra diretamente o DNA fragmentado para fora da cabeça espermática usando um campo elétrico. A imagem resultante assemelha-se a um "cometa", onde a cabeça representa DNA intacto e a cauda representa cadeias fragmentadas. O "Momento da Cauda" e "% DNA da Cauda" fornecem uma medida quantitativa da gravidade do dano.
Por que é Essencial (A Vantagem de Sensibilidade)
O Ensaio Cometa é amplamente considerado um dos métodos mais sensíveis para detetar danos no DNA. Quebras de Cadeia Simples vs. Dupla: O Ensaio Cometa alcalino pode detetar tanto quebras de cadeia simples (SSB) como dupla (DSB), oferecendo um perfil genético mais abrangente do que outros testes. Alto Poder Preditivo: A investigação indica que o Ensaio Cometa é um preditor superior do sucesso em FIV e ICSI. Um limiar de >25% de dano no DNA está fortemente correlacionado com infertilidade de fator masculino, enquanto >50% de dano está ligado a um declínio significativo nas taxas de nascimento vivo. Análise de Célula Individual: Permite a avaliação mesmo de amostras de concentração muito baixa (criptozoospermia), o que é difícil para métodos baseados em citometria de fluxo.
Como está em Conformidade com os Padrões
Embora o teste SCD seja excelente para rastreio de rotina, a 6.ª Edição da OMS reconhece o Ensaio Cometa como uma ferramenta sofisticada de "Exame Avançado". O nosso kit padroniza a consistência do gel de agarose e o tempo de lise, que são as duas variáveis mais críticas na eletroforese, garantindo que os laboratórios possam alcançar resultados repetíveis e de qualidade publicável.
Referências
- Simon L, et al. (2011). "Sperm DNA damage measured by the alkaline Comet assay as an independent predictor of male infertility and IVF success." Fertility and Sterility.
- Ribas-Maynou J, et al. (2013). "Comprehensive analysis of sperm DNA fragmentation by five different assays." Andrology.
- OMS (2021). Manual de Laboratório para Exame e Processamento de Sémen Humano, 6.ª Edição.
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